В работе впервые описан спектрофотометрический метод определения пероксидазной активности миелопероксидазы (МПО) в плазме крови человека с использованием в качестве субстрата о-дианизидина (o-DA). Определены оптимальные условия (рН, концентрация Н2О2), при которых основной вклад в реакцию окисления o-DA плазмой вносит МПО. Определение концентрации МПО проводили с помощью оригинального иммуноферментного анализа (ИФА) с использованием антител, полученных иммунизацией крыс и кроликов. Разработанный нами ИФА характеризуется высокой чувствительностью (0.2-250 нг/мл). Между активностью МПО, определенной спектрофотометрическим методом, и уровнем МПО, измеренным с помощью ИФА, в плазме крови 38 здоровых доноров выявлена достоверная положительная корреляционная зависимость (Р<0.0001). Предложенные новые подходы к определению МПО в плазме могут быть использованы для оценки концентрации и активности фермента, а также эффективности механизмов, регулирующих и ингибирующих функцию МПО в физиологических условиях и при различных воспалительных заболеваниях.
Горудко И.В., Черкалина О.С., Соколов А.В., Пулина М.О., Захарова Е.Т., Васильев В.Б., Черенкевич С.Н., Панасенко О.М. (2009)Новые подходы к определению концентрации и пероксидазной активности миелопероксидазы в плазме крови человека. Биоорганическая химия. Т. 35, №5, С. 629-639