Впервые доказано существование в грудном молоке (ГМ) комплекса медьпротеида–церулоплазмина (ЦП, ферро :O2- оксидоредуктаза, КФ 1.16.3.1) и...
Впервые доказано существование в грудном молоке (ГМ) комплекса медьпротеида–церулоплазмина (ЦП, ферро :O2- оксидоредуктаза, КФ 1.16.3.1) и лактоферрина (ЛФ). Электрофоретическая подвижность ЦП в ГМ при ПААГ электрофорезе в неденатурирующих условиях меньше, чем у ЦП из плазмы крови, и иден тична подвижности комплекса, образующегося при смешивании очищенных препаратов ЦП и ЛФ. При аффинной хроматографии делипидированного ГМ на ЦП сефарозе сорбировался ЛФ. В элюате 0,3 М NaCl с помощью Ds Na ПААГ электрофореза выявлена единственная 78 кДа зона, которая иммунологически и по определению N- концевой аминокислотной последовательности соответствует ЛФ. Синтетические пеп тиды R R R R (N концевой пептид ЛФ (2–5)) и K R Y K Q R V K N K (С концевой пептид PACAP 38 (29–38)) эффективно элюировали ЛФ с ЦП сефарозы. Хроматографические смолы, применяемые для вы деления ЦП (AE Агароза) и ЛФ (СМ Сефадекс), не сорбируют комплекс ЦП–ЛФ из снятого ГМ. Анион ные пептиды ЦП (586–597), (721–734) и (905–914) эффективно элюировали ЦП с АЕ Агарозы, но не дис социировали комплекс ЦП–ЛФ. При добавлении к ГМ, пропущенному через CM -Сефадекс, антител к ЛФ вместе с ЛФ коиммунопреципитировал ЦП. Выделение комплекса ЦП–ЛФ из ГМ включало хроматогра фию на CM-Сефадексе, спиртовое осаждение и аффинную хроматографию на AE Агарозе, что позволило добиться чистоты комплекса 98%. Полученный комплекс ЦП–ЛФ (1 : 1) был разделен на компоненты при хроматографии на гепарин -сефарозе. При ограниченном триптическом гидролизе препаратов ЦП из ГМ и
плазмы крови выявлены идентичные протеолитические фрагменты.
Соколов АВ, Пулина МО, Захарова ЕТ, Сусорова АС, Рунова ОЛ, Колодкин НИ, Васильев ВБ. (2006) Обнаружение и выделение из грудного молока комплекса церулоплазмина и лактоферрина.// Биохимия. Т. 71. С. 208-215.
