Изучено влияние различных форм лактоферрина (ЛФ) на ферроксидазную активность церулоплазмина (ЦП). Сравнение встраивания окисленных ЦП ионов Fe3+ в ЛФ и сывороточный трансферрин (ТФ) показало, что апо-ЛФ связывал окисленное железо при pH 5.5 в 7 раз, а при pH 7.4 в 4 раза быстрее, чем апо-ТФ в тех же условиях. При окислении Fe2+, катализируемом ЦП, апо-ЛФ в 1.25 раза увеличивал скорость окисления Fe2+ при соотношении ЦП:ЛФ – 1:1. ЛФ, насыщенный Fe3+ или Cu2+, увеличивал скорость окисления железа в 1.6 и 2 раза при молярном соотношении ЦП и холо-ЛФ, равном 1:1 и 1:2, соответственно. При добавлении к ЦП избытка апо-ЛФ (ЦП:апо-ЛФ<1:1) или холо-ЛФ (ЦП:холо-ЛФ<1:2) скорость окисления железа более не изменялась. В грудном молоке обнаружен комплекс ЦП-ЛФ, проявляющий ферроксидазную активность.
Соколов АВ, Пулина МО, Захарова ЕТ, Шавловский ММ, Васильев ВБ. (2005) Влияние лактоферрина на ферроксидазную активность церулоплазмина.// Биохимия. Т. 70. С. 1231-1236.

Впервые доказано существование в грудном молоке (ГМ) комплекса медьпротеида–церулоплазмина (ЦП, ферро:O2-оксидоредуктаза, КФ 1.16.3.1) и лактоферрина (ЛФ). Электрофоретическая подвижность ЦП в ГМ при ПААГэлектрофорезе в неденатурирующих условиях меньше, чем у ЦП из плазмы крови, и идентична подвижности комплекса, образующегося при смешивании очищенных препаратов ЦП и ЛФ. При аффинной хроматографии делипидированного ГМ на ЦПсефарозе сорбировался ЛФ. В элюате 0,3 М NaCl с помощью DsNaПААГэлектрофореза выявлена единственная 78 кДа зона, которая иммунологически и по определению N-концевой аминокислотной последовательности соответствует ЛФ. Синтетические пептиды RRRR (Nконцевой пептид ЛФ (2–5)) и KRYKQRVKNK (Сконцевой пептид PACAP 38 (29–38)) эффективно элюировали ЛФ с ЦПсефарозы. Хроматографические смолы, применяемые для выделения ЦП (AEАгароза) и ЛФ (СМСефадекс), не сорбируют комплекс ЦП–ЛФ из снятого ГМ. Анионные пептиды ЦП (586–597), (721–734) и (905–914) эффективно элюировали ЦП с АЕАгарозы, но не диссоциировали комплекс ЦП–ЛФ. При добавлении к ГМ, пропущенному через CM-Сефадекс, антител к ЛФ вместе с ЛФ коиммунопреципитировал ЦП. Выделение комплекса ЦП–ЛФ из ГМ включало хроматографию на CM-Сефадексе, спиртовое осаждение и аффинную хроматографию на AEАгарозе, что позволило добиться чистоты комплекса 98%. Полученный комплекс ЦП–ЛФ (1 : 1) был разделен на компоненты при хроматографии на гепарин-сефарозе. При ограниченном триптическом гидролизе препаратов ЦП из ГМ и плазмы крови выявлены идентичные протеолитические фрагменты.
Соколов АВ, Пулина МО, Захарова ЕТ, Сусорова АС, Рунова ОЛ, Колодкин НИ, Васильев ВБ. (2006) Обнаружение и выделение из грудного молока комплекса церулоплазмина и лактоферрина.// Биохимия. Т. 71. С. 208-215.

При добавлении к церулоплазмину (ЦП) лактоферрина (ЛФ) и миелопероксидазы (МПО) формируется тройной комплекс ЦП–ЛФМПО. Комплекс образуется при физиологических условиях, а также в условиях дискэлектрофореза без детергентов. Поликлональные антитела к ЛФ и к МПО вытесняют данные белки из комплекса ЦП–ЛФ–МПО. Фрагмент нейропептида РАСАР 38 (29–38) и протамин замещают ЛФ и МПО в комплексе ЦП–ЛФ–МПО, связываясь с ЦП. Взаимодействию ЛФ и МПО с ЦПсефарозой препятствуют ионная сила выше 0,3 M NaCl и рН ниже 4,1 (ЛФ) и 3,9 (МПО). Из частично гидролизованного ЦП с помощью аффинной хроматографии выделены два пептида (50–109 и 929–1012), вытесняющие ЦП из комплексов с ЛФ и МПО. Наблюдалось образование комплексов между ЦП семи видов млекопитающих и МПО человека или собаки. При инъекции в кровяное русло крыс МПО человека в кровотоке обнаруживался ее комплекс с ЦП крысы. Комплексы ЦП–ЛФ, ЦП–МПО и ЦП–ЛФ–МПО обнаружены при анализе 80 проб сыворотки крови и девяти экссудатов из гнойных очагов от больных с воспалением, а также 45 проб сыворотки крови и плевральной жидкости больных с плевритами различной этиологии.
Соколов АВ, Пулина МО, Агеева КВ, Айрапетов МИ, Берлов МН, Волгин ГН, Марков АГ, Яблонский ПК, Колодкин НИ, Захарова ЕТ, Васильев ВБ. (2007) Взаимодействие церулоплазмина, лактоферрина и миелопероксидазы.// Биохимия. Т. 72. С. 506-514.

Для оценки хлорирующей активности миелопероксидазы и влияния на нее церулоплазмина и лактоферрина в составе комплексов миелопероксидаза-церулоплазмин и миелопероксидаза-церулоплазмин-лактоферин использовали метод хемилюминесценции люминола. Впервые показано: добавление Н2О2 в систему «миелопероксидаза+Cl?+люминол» сопровождается быстрой вспышкой хемилюминесценции; интенсивность вспышки резко снижается в отсутствие миелопероксидазы или Cl?; ингибитор миелопероксидазы – NaN3, перехватчики HOCl – таурин или метионин, а также субстрат пероксидазного цикла миелопероксидазы – гваякол предотвращали свечение. Сделано заключение, что наблюдаемая хемилюминесценция обусловлена функционированием цикла галогенирования миелопероксидазы, а регистрируемая светосумма является мерой хлорирующей активности фермента. Сравнительный анализ влияния церулоплазмина на активность миелопероксидазы, проведенный тремя независимыми методами (хемилюминесценция, определение хлорирующей активности миелопероксидазы с помощью таурина, а также измерение ее пероксидазной активности) показал, что церулоплазмин ингибирует функцию миелопероксидазы. Лактоферин сам по себе не оказывал достоверного влияния на активность миелопероксидазы. Будучи встроенным в тройной комплекс миелопероксидаза-церулоплазмин-лактоферин, лактофеприн не препятствовал ингибирующему эффекту церулоплазмина в отношении миелопероксидазы. Важно отметить, что ингибирующий эффект церулоплазмина в отношении хлорирующей и пероксидазной активности миелопероксидазы, зарегистрированный традиционными методами, проявляется лишь при весьма значительном избытке церулоплазмина по отношению к миелопероксидазе, тогда как метод хемилюминесценции позволяет выявить ингибирование миелопероксидазы при малых стехиометрических соотношениях белков, которые реально имеют место в комплексах миелопероксидаза-церулоплазмин и миелопероксидаза-церулоплазмин-лактоферин. Для выяснения механизма влияния церулоплазмина на миелопероксидазу был проведен анализ его ингибирующей активности, который показал, что церулоплазмин тем эффективнее ингибирует пероксидазную активность миелопероксидазы, чем бо'льшие молекулярные размеры имеет субстрат. Таким образом, ингибирующий эффект церулоплазмина на уровне комплекса миелопероксидаза-церулоплазмин связан со стерическими препятствиями для связывания субстратов миелопероксидазы, возникающими за счет белок-белковых взаимодействий.
Панасенко ОМ, Чеканов АВ, Власова ИИ, Соколов АВ, Агеева КВ, Пулина МО, Черкалина ОС, Васильев ВБ. (2008) Влияние церулоплазмина и лактоферрина на хлорирующую активность лейкоцитарной миелопероксидазы. Изучение методом хемилюминесценции.// Биофизика. Т. 53, С. 573-581.